Un tren special care circulă din Antarctica până în junglă poate înceta să mai existe, iar motivul se datorează deteriorării căilor ferate. Animalele, de teamă să nu piardă singurul mijloc de transport care le permite să călătorească, au apelat la Diego pentru ajutor la Go Diego Go! Salvarea lui Diego pe calea ferată. Băiatul este gata să ajute, implicându-te în implementarea planului său. Implică repararea drumului, dar mai întâi trebuie să pui toate animalele în cărucioare. Pasagerii sunt de acord să călătorească numai în compania de felul lor, așa că există un transport separat pentru pinguini, căprioare, urși și așa mai departe. Când toate animalele au fost plasate, trenul își va începe călătoria și înainte de fiecare oprire trebuie să asamblați drumul ca un puzzle, rotind secțiuni individuale în Go Diego Go! Salvarea lui Diego pe calea ferată.
